淫羊藿提取物淫羊藿苷(icariine)的测定

淫羊藿提取物淫羊藿苷(icariine)的测定

1．范围

本标准适用于测定淫羊藿(Epimedium, HERBA   EPIMEDII，E.graneliflerum Merr,小蘗科)中淫羊藿苷(icariine)含量的测定。

2．原理

  由于淫羊藿甙在紫外区有吸收，通过选择该物质的最大吸收波长，以获得最大的灵敏度和抗干扰能力，选择合适的洗脱剂，以测定柱洗脱液在流动池中吸收紫外光的大小来确定其含量。

3．试剂  

3.1 重蒸水   

3.2 乙腈（色谱纯）

3.3 冰醋酸（分析纯）

3.4 甲醇（分析纯）

3.5 淫羊藿甙标准品(icariine，C33H40O15)( 淫羊藿糖苷epimedium？

4．仪器

4.1 高效液相色谱仪（SHIMADZU）

4.2 分析天平（1/10000）

4.3 超声波清洗仪

4.4   0.45 m 微孔过滤器

4.5 容量瓶

4.6 带塞小玻璃瓶

4.7 色谱柱 Kromasil   ODS   C18-5   200×0.46

5．分析步骤

5.1 标准品供试液

   标样制备 精密称取淫羊藿甙标样用甲醇溶解，使其浓度为0.1mg/ml,过过0.45m滤膜，置冰箱贮存。

5.2 待测样品供试液

   精确称取20mg提取物于50ml容量瓶中，用甲醇超声溶解，冷却定容，0.45 m微孔滤膜过滤为供试液。

精密称取本品叶片粉末(过40目筛)约0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇20ml，密塞，称定重量，超声处理1h，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

5.3 色谱条件

    流动相   A：水:冰醋酸=50:1   B：乙腈

     A : B = 71 : 29 ( V / V)

    流速   0.7ml/min

    进样量：   10l

    波长：   270nm

    柱温： 30℃

5.4 样品的测定：

   精确吸取待测样品供试液与标准品供试液各10l，注入液相色谱仪，得出峰面积。

5.5 计算：

    根据样品与标准品各峰峰面积之比比较各种成份的含量

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