HPLC法测定儿茶素

HPLC法测定儿茶素

1)试剂

a. 甲醇（色谱纯）b. 冰醋酸（分析纯）c.甲酰胺（分析纯）   b. 重蒸水     

2)仪器

高效液相色谱仪（SHIMADZU）    分析天平（1/10000）   

    超声波清洗仪                    0.45 mm 微孔过滤器       

    50 ml 容量瓶                    带塞小玻璃瓶

3)色谱条件

色谱柱    Shim-pack   ODS C18 5 mm   4.6´150mm

波长     278nm

流动相   A: 水        B: 甲酰胺:甲醇:冰醋酸=40:2:1.5

流速     1.1 ml/min

进样量   10 ml

4)样品制备

（1）待测样品   精确称取30mg提取物于50ml容量瓶中，用水超声溶解，冷却定容，0.45 mm微孔滤膜过滤为供试液。

标样制备   精密称取混合标样用水溶解，使其浓度为0.6mg/ml，过0.45mm滤膜，置冰箱贮存。

5)计算

根据各峰峰面积利用外标法计算各种成份的含量。

样品中各组分的含量%=A1×C×V

                                   A2×W